几天后，里宾特洛甫秘密抵达罗马。在梵蒂冈附近的一座别墅里，他与意大利独裁者贝尼托·墨索里尼进行了闭门会谈。里宾特洛甫将阿道夫的提议和盘托出，承诺给予意大利丰厚的利益回报。
墨索里尼坐在铺着红色丝绒的沙发上，手指轻轻敲击着扶手，眼中闪烁着贪婪的光芒。
“南斯拉夫是巴尔干半岛的绊脚石，”墨索里尼说道，“多年来，他们一直阻碍意大利在巴尔干的扩张。如果德国愿意支持我，我很乐意对南斯拉夫采取行动。但我需要德国明确的军事支持，一旦开战，德国必须出兵协助意大利。”
“这是当然，”里宾特洛甫立刻回应，“德国和意大利是不可分割的盟友，我们将共同进退。只要意大利对南斯拉夫发出威胁，德国将在边境集结军队，牵制捷克斯洛伐克和波兰的兵力，让他们无法支援南斯拉夫。”
会谈结束后，墨索里尼立即召开内阁会议，宣布意大利将与德国结成“钢铁同盟”，共同应对巴尔干半岛的局势。意大利军方随即开始动员，在与南斯拉夫接壤的边境地区部署了12个步兵师和3个装甲师，并派遣海军舰队前往亚得里亚海，封锁南斯拉夫的海岸线。
1938年7月5日，意大利驻南斯拉夫大使突然约见南斯拉夫外交大臣扬科维奇，递交了一份措辞严厉的最后通牒。
通牒中指责南斯拉夫加入多瑙河同盟是“对意大利国家安全的严重威胁”，要求南斯拉夫立即退出同盟，并与德国、意大利签署友好互助条约；同时，要求南斯拉夫割让达尔马提亚地区给意大利，以“补偿意大利在巴尔干半岛的利益损失”。
“如果南斯拉夫在72小时内不接受这些条件，”意大利大使傲慢地说道，“意大利将采取包括军事行动在内的一切必要措施，来维护自己的利益。”
扬科维奇接过通牒，脸色瞬间变得惨白。他知道，意大利的威胁绝非空穴来风，边境地区的军事调动已经表明，意大利已经做好了开战的准备。他立即将这一情况上报给南斯拉夫国王彼得二世和首相斯托亚迪诺维奇。
贝尔格莱德王宫的紧急会议室内，气氛凝重到了极点。斯托亚迪诺维奇眉头紧锁，手中紧握着那份意大利的最后通牒，指节因用力而发白。“意大利人太狂妄了，”首相的声音带着压抑的怒火，“达尔马提亚是南斯拉夫的固有领土，让我们割让领土，这是绝对不可能的！”
扬科维奇忧心忡忡地说道：“首相先生，我们现在的处境非常艰难。意大利在边境部署了大量军队，亚得里亚海的海岸线被封锁，我们的海上贸易已经陷入停滞。更糟糕的是，匈牙利和保加利亚也开始蠢蠢欲动。”
扬科维奇话音刚落，陆军总参谋长就匆匆走进会议室，递上一份情报报告：“陛下，根据最新情报，匈牙利已经在与我们接壤的伏伊伏丁那地区集结了8个步兵师和2个骑兵师，霍尔蒂海军上将发表公开讲话，声称要收回伏伊伏丁那地区的‘固有领土’。保加利亚也在多布罗加地区部署了6个步兵师，鲍里斯三世已经向我国发出照会，要求归还多布罗加地区。”
“三面受敌！”首相重重地拍了一下桌子，“这一定是德国在背后操纵的，他们想瓦解我们的同盟，孤立捷克斯洛伐克。”
扬科维奇说道：“陛下，首相先生，我们已经向捷克斯洛伐克、波兰和罗马尼亚发出了求救电报，希望他们能出兵支援我们。”
“但捷克斯洛伐克回复说，他们的军队需要防备德国在边境的动向，无法抽调大量兵力支援我们；波兰则态度暧昧，只说会‘密切关注局势’；罗马尼亚虽然表示愿意提供一些物资援助，但也明确表示不会出兵与意大利、匈牙利和保加利亚为敌。”
会议室里陷入了死寂。所有人都明白，多瑙河同盟虽然表面上看似强大，但各国都有自己的利益考量，在面临多重威胁时，很难做到真正的同仇敌忾。南斯拉夫此时就像一个被孤立的战士，独自面对三个强大的敌人。
“我们的军队能支撑多久？”彼得二世问道，语气中带着一丝不易察觉的绝望。
陆军总参谋长叹了口气，如实回答：“陛下，我们目前能动员的总兵力约为80万，其中大部分是步兵，装甲部队和空军的实力相对薄弱。意大利的装甲师和空军在欧陆处于领先水平，匈牙利和保加利亚的军队虽然装备不如意大利，但他们的兵力总和超过了14万。如果三国同时对我们发动进攻，我们最多只能坚守一个月。”
“一个月……”彼得二世喃喃自语，眼中充满了挣扎。他知道，南斯拉夫一旦开战，必将陷入生灵涂炭的境地。作为国王，他有责任保护自己的子民，但也不能轻易放弃国家的主权和领土完整。
接下来的两天，贝尔格莱德王宫灯火通明，紧急会议连续召开。政府官员、军方将领、外交使节围绕着“战与和”的问题展开了激烈的争论。
主战派将领们慷慨激昂地表示，宁愿战死也绝不向意大利等国屈服。“我们有坚固的山地防御工事，”一位将军说道，“意大利的装甲部队在山区无法发挥优势，我们的山地部队可以利用地形优势，给敌人造成沉重打击。只要我们坚持抵抗，国际社会一定会谴责意大利的侵略行为，或许英法两国会出手干预。”
但主和派官员则认为，主战无疑是自寻死路。“英法两国推行绥靖政策，他们绝不会为了南斯拉夫而与意大利、德国为敌，”一位内阁大臣说道，“我们的同盟国无法提供有效的支援，仅凭我们自己的力量，根本无法抵挡三国的联合进攻。与其让国家陷入毁灭，不如暂时妥协，等待合适的时机再图反击。”
就在最后通牒期限即将到来的前几个小时，斯托亚迪诺维奇首相提出了一个折中方案：“陛下，我们可以暂时同意退出多瑙河同盟，与意大利、德国签署表面上的友好条约，以此换取和平。但我们可以暗中与捷克斯洛伐克保持联系，继续进行军事合作。同时，我们可以以‘需要时间与国内各方协商’为由，拒绝割让达尔马提亚地区，拖延时间，等待局势的变化。”
彼得二世沉默了许久，最终点了点头。
扬科维奇立即前往意大利大使馆，转达了南斯拉夫的决定。意大利大使将这一情况上报给墨索里尼后，墨索里尼与阿道夫进行了紧急磋商。阿道夫认为，南斯拉夫退出多瑙河同盟已经达到了瓦解四国同盟的初步目的，不必急于一时逼迫南斯拉夫割让领土。
墨索里尼也认为，南斯拉夫已经做出了妥协，继续施压可能会导致南斯拉夫狗急跳墙，不如先接受南斯拉夫的提议，再寻找合适的时机进一步扩大自己的利益。
1938年7月8日，南斯拉夫正式宣布退出多瑙河同盟，并与德国、意大利签署了《三国友好互助条约》。消息传到布拉格，贝奈斯总统悲痛欲绝。他知道，南斯拉夫的退出意味着多瑙河同盟的瓦解，捷克斯洛伐克将再次陷入孤立无援的境地。
在华沙和布加勒斯特，波兰和罗马尼亚政F也感到了前所未有的压力。他们意识到，没有了南斯拉夫的支持，多瑙河同盟已经名存实亡，面对德国和意大利的威胁，他们也不得不重新考虑自己的外交政策。
南斯拉夫退出多瑙河同盟后，巴尔干半岛的局势发生了巨大的变化。德国和意大利趁机加强了对巴尔干半岛的渗透和控制。
墨索里尼任命自己的女婿齐亚诺为外交大臣，专门负责巴尔干事务，不断向南斯拉夫施加压力，要求南斯拉夫进一步妥协。
阿道夫则将目光转回了捷克斯洛伐克。他认为，南斯拉夫的退出已经让捷克斯洛伐克失去了重要的盟友，此时正是再次向捷克斯洛伐克发难的好时机。
德国的宣传机器开始再次煽动苏台德地区德意志族人的民族情绪，边境地区的军事调动也日益频繁。